Search This Blog

جارٍ التحميل...

الثلاثاء، 22 نوفمبر، 2016

نمودج عقد التزام مسرحية فيلم


مسـرح ………. 
…………

- عقـد التـزام ابتدائي -


بين:
السيد …………… بصفته رئيسا لفرقة……….، طرفا أولا
والفنانة ……………. ، الحاملة للبطاقة الوطنية رقم:               بصفتها:  ممثلة،  طرفا ثانيا      

تم الاتفاق والتراضي على ما يلي:

 

1 – أن يشارك الطرف الثاني بصفته المشار إليها أعلاه في إنجاز مسرحية "………………." اعداد واخراج: ………… المرشحة لدعم وزارة الثقافة صنف دعم انتاج الفرق المسرحية ، برسم موسم 2016/2017.
2 – يلتزم الطرف الثاني بمواكبة جميع مراحل إعداد المسرحية وعروضها خلال الموسم المسرحي المذكور.
3 – يتقاضى الطرف الثاني تعويضا عن فترة التداريب بما قدره مئتي درهم (200 د) لليوم الواحد، وتحتسب القيمة الإجمالية بقدر الأيام المنجزة فعليا (على ألا تتعدى 45 يوما).
4 – يتقاضى الطرف الثاني أجرا عن كل عرض من العروض المتعاقد عليها، قدره ألفا درهم (2000 د).
5 – أي خلاف بين الطرفين يحل أولا داخل مكتب الفرقة، وإذا تعذر ذلك يتم اللجوء إلى المحاكم المختصة.
6 – هذا العقد يخص مسرحية "ليلى والذئب"
بين:
السيد ……………… بصفته رئيسا لفرقة…………..طرفا أولا
والفنان ………..،الحامل للبطاقة الوطنية رقم:  ………….    بصفته: ملحنا ،  طرفا ثانيا      

تم الاتفاق والتراضي على ما يلي:

 

1 – أن يشارك الطرف الثاني بصفته المشار إليها أعلاه في إنجاز مسرحية "……….." اعداد واخراج: ……….. المرشحة لدعم وزارة الثقافة صنف دعم انتاج الفرق المسرحية ، برسم موسم 2016/2017.
2 – يلتزم الطرف الثاني بإنجاز الموسيقى الخاصة بالمسرحية .
3 – يتقاضى الطرف الثاني أجرا جزافيا، قدره عشرون الف درهم (20000 د).
4 – أي خلاف بين الطرفين يحل أولا داخل مكتب الفرقة، وإذا تعذر ذلك يتم اللجوء إلى المحاكم المختصة.
5 – هذا العقد يخص مسرحية "………..

الطرف الأول/ رئيس الفرقة                                        الطرف الثاني



الطرف الأول/ رئيس الفرقة                                        الطرف الثاني




عوامل عدة مختلفة تؤثر وتساعد على نمو البكتيريا

أ‌-  تأثير المعادن الثقيلة على النمو البكتيري:

أغلب المعادن الثقيلة أو حتى أملاحها تكون ذات تأثير على البكتيريا وإن  كانت بتخفيف عالي حيث أن تلك المعادن تملك قدرة عالية على الارتباط بالبروتينات الخلوية مما يؤدي إلى حدوث تغيرات في طبيعة البروتينات. تمتاز المعادن الثقيلة بامتلاكها خاصية التأثير المزدوج : حيث وجد أنه بعكس التركيزات المرتفعة فإن التركيزات الضئيلة في المحاليل المائية لها تأثير منشط لنمو البكتيريا، وقد عرف هذا العمل المزدوج بالفعل الأوليجوديناميكي (Oligodynamic action).

الفعل الأوليجوديناميكي (Oligodynamic action).
تسمية يونانية عبارة عن جزئين اليجو: تركيز صغير و ديناميكي: تأثير قوي. الأليجوديناميكي  تعني التـأثير القوي للتراكيز الصغيرة من المعادن (خاصة الفضة) في المحاليل المائية كمنشط للخلية البكتيرية.

أسم التجربة : دراسة تأثير المعادن الثقيلة على النمو الميكروبي.
نوع الميكروب :
البكتيريا : Bacillus , E.coli

المواد والأدوات: فلاسكات تحتوي على بيئة   ( N.A) – ابر تلقيح بكتيريا – ملقط معقم – أطباق بتري فارغة ومعقمة – قطع معدنية مختلفة موضوعة في حمض النيتريك المركز.
طريقة العمل:
1- تحت شروط التعقيم تلقح البيئة N.A السائلة والمبردة بجزء من المزرعة البكتيرية ثم تحرك جيدًا حتى تمتزج وتصب في الأطباق وتترك حتى تتجمد.
2- بواسطة ملقط معقم بالتلهيب الكحولي يتم وضع احد القطع المعدنية بعد غسلها بالماء وتجفيفها في منتصف الطبق الملقح بالمزرعة البكتيرية مع الضغط عليها قليلا لتثبيتها.
3- تحضن أطباق البكتيريا عند 37م° لمدة 24 ساعة.
4- بعد التحضين تفحص الأطباق لتسجيل مناطق التثبيط Inhibition Zones حول القطع المعدنية  ثم يقاس قطرها بالمسطرة.


الإنزيمات الميكروبية -1-

الأنزيمات: عبارة عن مادة تفرز بواسطة بعض الكائنات الحية الدقيقة لها القدرة على تعجيل التفاعلات الأيضية حيث تقوم بتحليل الكثير من المواد المعقدة الكربوهيدراتية والبروتينية والدهنية لتحوله الى جزيئات صغيرة الحجم يمكن امتصاصها.
تقسم الأنزيمات إلى :
1-    أنزيمات أساسية (Constitutive Enzymes)  تتكون في الخلايا بصفة مستمرة بصرف النظر عن وجود أو عدم وجود أوساط تفاعلها.
2-    أنزيمات تكيفية (Adaptive  Enzymes)  تتكون فقط عند الحاجة إليها ثم تختفي بعد ذلك وتسمى العملية بفقد التكيف الأنزيمي.

1-   أنزيم الاميليز ( Amylase enzyme)التحلل المائي للنشا Starch hydrolysis

اسم التجربة: اختبار قدرة البكتيريا على تحليل النشا
الهدف من التجربة: التمييز بين الكائنات الدقيقة عن طريق قدرتها على تحليل النشا
- النشا مركب كربوهيدراتي معقد عبارة عن نوعين من الوحدات:
• اميلوز Amylose ( سلاسل مستقيمة من الجلوكوز) و اميلوبكتين  ) Amylopectinسلاسل متفرعة من الجلوكوز)
- بعض الميكروبات تستطيع  تحليل النشا بإفراز الإنزيمات:
ά-B amylase  ( يكسر سلاسل الاميلوز المستقيمة إلى وحدات الجلوكوز)
1-6 glucosidase amilo ( يكسر سلاسل الاميلوبكتين المتفرعة الى وحدات الجلوكوز)

نوع الميكروب :
البكتيريا : Bacillus , E.coli

المواد والأدوات: بيئة أجار النشا– ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة – أطباق بتري فارغة ومعقمة – محلول اليود.


طريقة العمل:

1-   كل مجموعة لديها  2 طبق بتري يحتوي على بيئة أجار النشا
2-   يلقح منتصف الطبق بمزرعة بكتيرية حديثة العمر بواسطة إبرة تلقيح ويترك الطبق الأخر كنترول للمقارنة
3-   يحضن الطبق مقلوب عند 37م لمدة 24-48ساعة.

·       يكشف عن قدرة البكتيريا على تحلل النشا باسخدام  كاشف اليود حيث يغمر سطح البيئة بكمية مناسبة من اليود. وجود هالة شفافة حول النمو البكتيري يدل على إن البكتيريا قادرة على تحليل النشا  أي إنها تفرز إنزيم الأميليز للوسط الخارجي الذي يكسر النشا الى سكريات بسيطة ( الجلوكوز) وبالتالي تظهر المنطقة الشفافة الخالية من النشا مع تلون باقي البيئة باللون الأزرق الداكن . إذا لم يوجد منطقة عديمة اللون حول النمو يعني عدم قدرة البكتيريا على تحليل النشا (نشا + يود = لون أزرق)


2-أنزيم الجلاتينيز ( Gelatinase enzyme) اسالة الجيلاتين :Gelatin Liquefaction

اسم التجربة: دراسة قدرة البكتيريا على تحلل الجيلاتين.
الهدف من التجربة: التعرف على البكتيريا القادرة على اسالة الجيلاتين
الجيلاتين عبارة عن مادة بروتينية محضر من التحلل المائي للكولاجين تتحول إلى الحالة الجلاتينية عند إذابتها في الماء الساخن ثم إعادة تبريدها ويمكن  لبعض أنواع الميكروبات تحليلها مما يفقدها طبيعة التحول للحالة الجلاتينية وذلك يرجع إلى قدرة الميكروب  على إنتاج إنزيم خارجي Gelatinase  الذي يحلل الجيلاتين.

نوع الميكروب :
البكتيريا : Bacillus , E.coli

المواد والأدوات: بيئة الجلاتين المغذي– ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة .


طريقة العمل:
1-   كل مجموعة لديها 2 أنبوبة تحتوي على كمية مناسبة من بيئة الجيلاتين المغذي nutrient gelatin
2-   تلقح الأنبوبة بمزرعة بكتيرية حديثة العمر بطريقة الوخز( الأنبوبة الثانية كنترول)
3-   تحضن الأنابيب عند 30-37م لمدة من 48-72ساعة.
·       يكشف عن قدرة البكتيريا على تحليل الجيلاتين بوضع الأنابيب في وعاء يحتوي على ثلج ويترك لمدة 10 دقائق , ثم تمسك الأنبوبة ويتم إمالتها, إذا وجدت إن البيئة مازالت متماسكة يعني إن الجيلاتين لم يتحلل بواسطة البكتيريا أما إذا لاحظت إسالة الجيلاتين فهذا يدل على إن البكتيريا أفرزت إنزيم  Gelatinase الذي يحلل الجيلاتين





3-انزيم تحليل الكازين Hydrolysis of Casein

اسم التجربة: اختبار قدرة البكتيريا على تحليل الكازين.

الهدف من التجربة: تمييز الانواع البكتيرية المحللة للكازين
الكازين هو البروتين السائد في اللبن ( يعطي اللون الابيض) بعض الميكروبات تستطيع تحليله إلى وحدات صغيرة ذائبة ينتج عنها تكوين محلول اصفر رائق وتعرف هذه العملية بالببتنه Peptonization بإفراز الإنزيم الخارجي Caseinase الذي يحلل الكازين.

نوع الميكروب :
البكتيريا :   Bacillus , Streptococcus  Lactis

المواد والأدوات: بيئة أجار اللبن – ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة .

طريقة العمل:   تحت ظروف التعقيم
1-   كل مجموعة لديها 2 طبق يحتوي على بيئة  اجار اللبن.
2-   تحت ظروف التعقيم يلقح منتصف الطبق بالميكروبات المختبرة حديثة العمر بإبرة التلقيح ( الطبق الاخر كنترول)
3-   يحضن الطبق عند 37م° لمدة 24-48 ساعة
·       تسجل النتيجة بعد التحضين مباشرة, إذا لاحظت وجود هالة شفافة حول النمو البكتيري يدل على إن البكتيريا حللت الكازين بإفراز إنزيم الكازينيز, وإذا لم يوجد منطقة رائقة حول النمو دليل على عدم قدرة البكتيريا على تحلل الكازين

الإنزيمات الميكروبية -2-

1- اسم التجربة: اختبار الكاتاليز Catalase production test
الهدف من التجربة: التعرف على البكتيريا المنتجة للكاتاليز.
معظم البكتيريا الهوائية اجبارا واختيارية التهوية ( تستعمل O2 )  تنتج H2O2 ( فوق اكسيد الهيدروجين) واستمرار نموها في وجود هذا الناتج السام يعود لامتلاكها إنزيم الكاتاليز الذي يحلل H2O2
                 H2O2         catalase               2H2O   +  O2
نوع الميكروب :
البكتيريا : Staphylococcus ,E. coli

المواد والأدوات: محلول H2O2 – ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة- شرائح ميكرسكوبية نظيفة .

طريقة العمل:
1-   نضع قطرة من محلول 3% فوق أكسيد الهيدروجين على شريحة نظيفة.
2-   بواسطة إبرة التلقيح  المعقمة نأخذ جزء من النمو البكتيري وتوضع على على قطرة .H2O2
·       في حال ظهور فقاعات بيضاء اللون فإن ذلك يدل على إن البكتيريا موجبة لاختبار الكتاليز وعدم ظهور الفقاعات يعني إن البكتيريا سالبة لاختبار الكتاليز.



2- اسم التجربة: اختبار انتاج انزيمات الاكسيديز Oxidase enzyme test
الهدف من التجربة: تشخيص الأجناس المختلفة من البكتيريا السالبة لجرام
الاوكسيديز عبارة عن انزيمات مؤكسدة ضمن سلسلة الانزيمات التنفسية المسؤلة عن تفاعلات الفسفرة التاكسدية حيث تستطيع أكسدة بعض الامينات العطرية مثل Phenylenediamine لتكوين نواتج نهائية ملونة. البكتيريا التابعة لعائلة Enterobacteriaceae (سالبة) ومعظم انواع الجنس Pseudomonas ( موجبة).

Phenylenediamine           Oxidase                 Blue color 
نوع الميكروب :
البكتيريا : Pasudomonas ,E. coli

المواد والأدوات: قطع من ورق الترشيح – ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة.

طريقة العمل: تحت ظروف التعقيم
1-   نضع قطرة من دليل اختبار Oxidaseعلى ورقة الترشيح.
2-   بواسطة إبرة التلقيح  المعقمة نأخذ مستعمرة بكتيرية ثم توضع على ورقة الترشيح فوق القطرة.
·       في حال ظهور لون أزرق بنفسجي فإن ذلك يدل على إن البكتيريا موجبة لاختبار الاكسيديز وعدم ظهور اللون يعني إن البكتيريا سالبة لاختبار الاكسيديز.

3- تحلل الدهون Lipid hydrolysis 
اسم التجربة: اختبار قدرة البكتيريا على تحليل الدهون
الهدف من التجربة: التعرف على قدرة الأنواع البكتيرية على تحليل الدهن
قدرة البكتيريا على تحليل الدهون راجع الى افراز انزيم Lipase الذي يحلل جزيء الدهن الى جزيء جليسرول و3 جزيئات أحماض دهنية.

نوع الميكروب :
البكتيريا : Bacillus , E.coli ، Staphylococcus

المواد والأدوات: بيئة أجار الدهون– ابر تلقيح بكتيريا –ماصات معقمة .

طريقة العمل:
1-   تحت ظروف التعقيم يلقح وسط الطبق بيئة اجار الدهن بمزرعة حديثة العمر بإبرة التلقيح والطبق الثاني كنترول
2-   تحضن الأطباق عند  درجة حرارة37م° لمدة 48 ساعة.
3-   بعد التحضين نغمر الأطباق بكمية كافية من محلول كبريتات النحاس 20-10% لمدة 10 دقائق, ثم نتخلص من المحلول وتترك الإطباق مدة 3-5 دقائق ثم تفحص.
·       ظهور لون أزرق مخضر على خط التلقيح دليل على قدرة البكتيريا على تحليل الدهون  بإفرازها للإنزيم المحلل واللون يتكون نتيجة اتحاد كبريتات النحاس مع الأحماض الدهنية الناتجة عن التحلل .



4-     إنزيم تحلل السليلوز Enzymatic Hydrolysis of Cellulose :
السليلوز عبارة عن مادة كربوهيدراتية معقدة مكونة من عديدات التسكر ويمكن لبعض أنواع البكتيريا أن تحلل السيليولوز انزيميا تحت ظروف هوائية إلى وحدات الجلوكوز ، ولهذا النشاط أهمية كبرى في تحلل البقايا النباتية بالتربة حيث تعمل الكائنات الحية الدقيقة على عدم تكدسها بالأرض.

وهناك نوعان من تحلل السيليلوز:
1-  التحلل الهوائي
2-  التحلل اللاهوائي

أسم التجربة : التحلل الهوائي للسيليلوز.

المواد والأدوات: 5 مل من بيئة ديبوس Dubos medium, شرائط من ورق الترشيح , عينة من تربة زراعية , عينة من سماد الاسطبل.

طريقة العمل:
1-  يتم إضافة نصف جرام من عينة التربة الزراعية للأنبوبة . يتم إضافة نصف جرام من عينة السماد للأنبوبة
2-  يوضع شريط من ورق الترشيح ويغمر بالبيئة مع مراعاة أن يبرز جزء منه للخارج
3-  تحضن الانابيب على درجة 28م° لمدة 1-2 أسبوع.
4-  يلاحظ حدوث نمو وتآكل لورقة الترشيح عند سطح البيئة.

 أسم التجربة : التحلل اللاهوائي للسيليلوز.

المواد والأدوات: 5 مل من بيئة اومليانسكي Omliansky medium, شرائط من ورق الترشيح , عينة من تربة زراعية , عينة من سماد الإسطبل.

طريقة العمل:
1- يتم إضافة نصف جرام من عينة التربة الزراعية للأنبوبة . يتم إضافة نصف جرام من عينة السماد للأنبوبة

2- يوضع شريط من ورق الترشيح ويغمر بالبيئة مع مراعاة أن يبرز جزء منه للخارج.
3- يغطى سطح البيئة بطبقة من الزيت لتوفير الظروف اللاهوائية.
4- تحضن الانابيب على درجة 28م° لمدة 1-2 أسبوع.
5- يلاحظ حدوث نمو وتآكل لورقة الترشيح عند سطح البيئة.


1- دراسة تأثير إضافة مصادر مختلفة للكربون على النمو الفطري

تشكل العناصر الغذائية أهمية كبيرة لنمو الفطريات وفي حالة نقص أو تغير في تركيز هذه العناصر فإنها تؤثر على نمو الفطريات. من أهم هذه العناصر : الكربون C – النيتروجين N- الفسفور P – المغنيسيوم Mg – البوتاسيوم K حيث تحتاج الفطريات في تغذيتها إلى عناصر أساسية كبرى مثل (C , N , P , Mg , Ca ) ويكون احتياجها بكميات كبيرة وغياب أياً منها يؤثر سلبياً على النمو, أما العناصر الغذائية الصغرى فهي عناصر ضرورية لكن تحتاجها الفطريات بكميات قليلة وغياب أياً منها يمكن أن يؤثر على نمو الفطريات وهي(Fe , Co , Mn , Zn, Mo)
وسوف نلقي الضوء على أهمية بعض العناصر الأساسية الكبرى بالنسبة للفطريات:

اولاً :عنصر الكربون (C ):
1)   يشكل الكربون حوالي 50٪ من الوزن الجاف للخلية
2)   يعتبر الكربون جزء من مكونات الخلية التركيبية والوظيفية
3)   يوجد الكربون في أغلب مكونات الخلية ويوجد بصور وتراكيز مختلفة
4)   يدخل في جميع العمليات الايضية
5)   تستغل المصادر الكربونية الموجودة في الطبيعة من قبل الفطريات للحصول على وحدات بنائية أو كمصادر للطاقة مثل الكربوهيدرات.

تتوقف قدرة الفطر في استخدام المصادر الكربونية على:
أ‌-         تركيب المصدر الكربوني
ب‌-       قدرة الفطر على الاستفادة منه.

-      توضيح أثر اختلاف مصادر الكربون:
  تختلف الفطريات في مقدرتها على استعمال بعض المركبات كمصدر للكربون سواء كانت بسيطة مثل الجلوكوز والجالاكتوز أو مركبة مثل النشاء والسليولوز.
و لضمان نجاح التجربة يجب أن يكون مصدر النيتروجين بسيط وثابت وفي متناول استعمال أغلب أنواع الفطريات وتستعمل بيئات مركبة ذات تركيب ثابت ومعروف ولا تختلف إلا في مصدر الكربون.
أسم التجربة: دراسة تأثير إضافة مصادر مختلفة للكربون على النمو الفطري.

المواد والادوات: 6 دوارق زجاجية سعة كل منها 250 مل تحتوي على بيئة تشابك دوكس السائلة, ثاقب , مزرعة ميكروبية عمرها 5 أيام , ورق ترشيح, ميزان كهربائي . مصادر الكربون ( الجلوكوز , الجالاكتوز ,  المالتوز ، السكروز ، اللاكتوز، النشا ، كربونات الصوديوم).

طريقة العمل :
1-   تحضير لتر من بيئة تشابك دوكس السائلة بدون مصدر الكربون وهو سكر السكروز .
2-   يوزع كل من 100 مل من البيئة على عدد من الدوارق الزجاجية ونضع في كل دورق 2 جرام من مصادر كربونية مختلفة ( الجلوكوز , الجالاكتوز ,  المالتوز ، السكروز ، اللاكتوز، النشا ، كربونات الصوديوم).
3-   نعقم الدوارق في الاتوكلاف.
4-   نزع قرص من النمو الفطري باستخدام ابرة التلقيح ونضعه في كل دورق .
5-   تحضن المزارع الميكروبية في الحضان عند 28م° لمدة 7 أيام.
6-   نقدر الوزن الجاف للغزل الفطري بالجرام لمقارنة المصدر الكربوني المفضل للنمو.
7-   نرسم منحنى بياني يوضح العلاقة بين النمو الفطري والمصادر الكربونية.
8-   تسجل النتائج والتعليق على التجربة.


التعليق:
·       اتضح من النتائج أن أعلى نمو فطري كان على مصادر النشا و المالتوز و الجلوكوز.
·       النشا يعتبر من أفضل المصادر الكربونية و ذلك لأنه مستخلص من الأنسجة النباتية الحية حين يحتوي على بعض عوامل النمو المحفزة و هذا يدل على أن هذا  الفطر يفرز انزيم الاميليز حيث يتكسر  النشا الى سكر ثنائي ثم احادى و ذلك ببطء حتى لا يحدث تجمع للأحماض العضوية حيث أن النشا يتحول إلى دكسترين الذي يتحول إلى مالتوز ثم يتحول إلى جلوكوز يقوم الفطر بامتصاصه و الاستفادة منه.
·
·       النمو على المالتوز أعلى من الجلوكوز وذلك يرجع أن الفطر يفرز إنزيم المالتيز الذي يكسر المالتوز إلى وحدتين من الجلوكوز الذي يؤدي غالى نمو مرتفع للفطر.  
·       يعتبر الجلوكوز سكر أحادي شامل تستطيع أغلب الفطريات النمو عليه.
·       النمو على السكروز يعطي نمو اقل يرجع إلى عدم قدرة الفطر على افراز الانزيم الضروري لتكسير السكروز.
·       يعتبر الجلاكتوز مصدر كربوني ضعيف للنمو الفطري حيث أن هناك عدد من الفطريات لا تستطيع استخدامه وفي بعض الاحيان يعتبر سام لقليل من الفطريات.
·       كربونات الصوديوم تأثيرها مثبط للنمو و من الممكن إن ينمو الفطر قليلاً عليها لوجود بعض المواد الغذائية المخزنة داخل الفطر التي تساعده على النمو الضعيف.

2- دراسة تأثير إضافة مصادر مختلفة للنتروجين على النمو الفطري

ثانياً:عنصر النيتروجين (N):-
1.   يستخدم النيتروجين في الأغراض التركيبية والوظيفية في الخلية الفطرية مثل تكوين الأغشية الخلوية والأحماض النووية والبروتينات وغيرها.
2.   شكل النيتروجين له تأثير كبير على أيض الأحياء المجهرية فالفطريات لها قدرة على استخدام النيتروجين في صورة عضوية أو غير عضوية.
3.   لا يوجد مصدر نيتروجيني مفضل لجميع الفطريات حيث أن قدرة الفطر على الاستفادة منه  تعتمد على: أ- تركيز المصدر الكربوني
ب-عوامل النمو الأخرى مثل درجة تركيز أيون الهيدروجين و درجة الحرارة
 يضاف النيتروجين للوسط الغذائي في صورتين الصورة العضوية منل الاحماض الأمينية و البروتين و الصورة الغير عضوية مثل النترات و النتريت و الامونيا. 

-      توضيح أثر اختلاف مصادر النيتروجين:
من المعروف ان الفطريات تختلف من حيث استخدامها لمصادر النيتروجين ولضما ن نجاح التجربة يجب أن يكون مصدر الكربون بسيط وثابت وفي متناول استعمال كثير من الفطريات كلما أمكن حيث تستخدم بيئة مركبة ذات تركيب ثابت ومعروف ولا تختلف إلا في مصدر النيتروجين. ويجب أن يكون وزن النيتروجين في المصادر النيتروجينية المختلفة ثابت.

أسم التجربة: دراسة تأثير إضافة مصادر مختلفة للنتروجين على النمو الفطري.

المواد والادوات: 6 دوارق زجاجية سعة كل منها 250 مل تحتوي على بيئة تشابك دوكس السائلة, ثاقب , مزرعة ميكروبية عمرها 5 أيام , ورق ترشيح, ميزان كهربائي . مصادر النيتروجين ( الببتون , اسبرجين , نترات الصوديوم , كبريتات الأمونيوم ).



طريقة العمل :
1-   تحضير لتر من بيئة تشابك دوكس السائلة بدون مصدر الكربون وهو سكر السكروز .
2-   يوزع كل من 100 مل من البيئة على عدد من الدوارق الزجاجية ونضع في كل دورق 0,4 جرام من مصادر كربونية مختلفة ( الببتون , اسبرجين , نترات الصوديوم , كبريتات الأمونيوم )
3-   نعقم الدوارق في الاتوكلاف.
4-   نزع قرص من النمو الفطري باستخدام ابرة التلقيح ونضعه في كل دورق .
5-   تحضن المزارع الميكروبية في الحضان عند 28م° لمدة 7 أيام.
6-   نقدر الوزن الجاف للغزل الفطري بالجرام لمقارنة المصدر الكربوني المفضل للنمو.
7-   نرسم منحنى بياني يوضح العلاقة بين النمو الفطري والمصادر الكربونية.
8-   تسجل النتائج والتعليق على التجربة.

التعليق :

·       كان النمو الأفضل للفطريات على الاسبرجين مما يدل على تفضيل الفطر النمو على الحمض ألأميني كمصدر نيتروجيني حيث يقوم الفطر بامتصاصه كما هو بدون تكسير إلى آمونيا مما يؤدي إلى عدم وجود نواتج جانبية و أحماض و بالتالي يؤدي ذلك إلى عدم وجود أي تغيير في تركيز أيون الهيدروجين و الوصول إلى أفضل نمو فطري عليه.
·
·       يقوم الفطر في الوسط الغذائي المحتوي على البيبتون كمصدر نيتروجيني بتكسير البيبتون بواسطة إنزيم البروتييز مما يؤدي إلى تجميع الأحماض الامينية وبالتالي نمو فطري سريع.
·
·       عند إضافة نترات الصودوم الى الوسط الغذائي يقوم الفطر بامتصاص النترات و الاستفادة منه تاركا الصوديوم في الوسط الذي يتفاعل  مع باقي المركبات في الوسط الغذائي مكونا بيكربونات الصوديوم التى تؤدى إلى ارتفاع طفيف في القلوية يؤدى إلى تقليل بسيط في النمو.

·       إضافة كبريتات الامونيا تؤدي إلى نمو فطري ضعيف و ذك يرجع إلى امتصاص الفطر للامونيا تاركا الكبريتات التي تتفاعل مع الماء في الوسط مكونا حمض كبريتيك الذي يؤدي إلى زيادة نسبة الحموضة و تثبيط شديد للنمو الفطري و العمليات الحيوية.
·
·       كان النمو الفطري على النتيروجين العضوي مثل الاسبراجين و البيبتون أفضل من النمو على النيتروجين الغير عضوي مثل كبريتات الامونيوم و نترات الصوديوم و ذلك يرجع إلى:

1.      إتاحة الأحماض الامينية في المصدر النتروجيني العضوي حيث لا يكون هناك حاجة لإعادة تكوينها التي تستغرق وقت طويل
1.
2.      المصادر النتروجبينية العضوية تحتوي على الفيتامينات و عوامل النمو التي تزيد من سرعة النمو والعمليات الحيوية.
2.