الاثنين، 21 نوفمبر، 2016

فحوصات الدهون


فحوصات الدهون
الكوليستيرول الكلي
الكوليستيرول هو مادة شمعية شبه دهنية تتكون بصورة طبيعية في جميع أجزاء الجسم. يحتاج جسمك إلى بعض من الكوليستيرول لكي يعمل بشكل ملائم. ولكن إذا كان لديك كمية كبيرة جدًا منه في الدم فيمكنه أن يترسب على الأسطح الداخلية للشرايين. ويسمى ذلك باللويحة. وتستطيع اللويحة أن تعمل على تضييق الشرايين أو حتى على سدها.
إن معدلات الكوليستيرول المرتفعة في الدم تزيد من مخاطر إصابتك بمرض في القلب.وترتفع معدلات الكوليستيرول الخاصة بك كلما تكبر في السن. وعادة لا تكون هناك إشارات أو أعراض تشير أن لديك نسبة عالية من كوليستيرول الدم ولكن يمكن اكتشاف تلك النسبة بإجراء فحص دم. ومن المرجح أن تكون لديك نسبة عالية من الكوليستيرول وذلك إذا كان هناك أفراد من أسرتك لديهم تلك النسبة أو إذا كانت لديك وزن زائد أو إذا كنت تتناول الكثير من الأطعمة الدهنية.
يمكنك العمل على إنقاص نسبة الكوليستيرول بواسطة ممارسة التمارين وتناول الكثير من الفواكه والخضروات.قد تحتاج أيضًا إلى تناول دواء لإنقاص الكوليستيرول.
أسباب فرط كوليستيرول الدم:
1- فرط كوليسترول الدم العائلي (FH)
2-  انخفاض الأيض بسبب مشاكل بالغدة الدرقية(قصور الدرقية)
3-أمراض الكلى
4- السكري وخاصة عندما تتم السيطرة عليه بشكل ضعيف
5-  إدمان الكحول
6- الزيادة في الوزن – وعلى الأرجح فإن هذا السبب الأكثر شيوعًا لمعدلات الكوليستيرول العالية.

أسباب فرط كوليستيرول الدم:
1-فرط الدرقية
2- أمراض الكبد
3-سوء التغذية
4-السرطان
5-العدوى أو الالتهاب المزمن

القاعدة:
Esters of cholesterol +H2O -------chloesterol esterase-------> cholesterol + fatty acids
Cholesterol +O2 ---------cholesterol oxidase -----------> cholest-4-en-one +H2O2
H2O2 +phenol+4-aminophenazone ------------peroxidase ------------> quinonimine

العينة
‌أ.      يوصى بأخذ عينة مقدارها 10 ميكرولتر من مصل الدم تحتوي على هيبارين أو بلازما رباعي أسيتيك ثنائي أمين الإيثيلين EDTA)). قم بجمع العينات بواسطة تقنية بزل الوريد القياسية. قد يستخدم الهيبارين كمضاد للتخثر لعينات البلازما. قم بحفظ العينات في حاويات مغلقة لتجنب حدوث تلوث أو تبخر. اتبع الاحتياطات العالمية عند القيام بالفصد أو التعامل مع عينات المريض أو ما تم معايرته أو أي منتجات أخرى أساسها هو مصل الدم. تخلص من المواد الملوثة بالنفايات المسببة للعدوى.
‌ب.    إذا كانت النتيجة أعلى من 19.3 ملمول/لتر فقم بتخفيف العينة قبل الترسيب بنسبة 2:1 بواسطة محلول ملحي نظامي ثم قم بضرب النتائج في 3 للحصول على التركيز الأصلي للكوليستيرول.
‌ج.     يبقى الكوليستيرول مستقرًا في مصل الدم لمدة 6 أيام عند درجة حرارة تتراوح من 4 إلى 25 درجة مئوية ولمدة 4 أشهر عند 20 درجة مئوية.
‌د.      العينات الدهنية تعمل على توليد تعكر في مزيج العينة/الكاشف وهو ما يؤدي إلى نتائج مرتفعة مغلوطة.
الكواشف والمواد
‌أ.      مقياس الضوء الطيفي
‌ب.    أنبوب من الجل (مادة تسريع التجلط)
‌ج.     منبذة
‌د.      الكواشف :
كاشف 3
محلول منظم                  أنانيب p H 6.9
فينول  90 ملمول/لتر
26 ملمول/لتر
كاشف 2
قنينة تحتوي على إنزيمين    أكسيداز الكوليستيرول
بيروكسيداز
أكسيداز الكوليستيرول
4-أمينوفينازون      399 وحدة/لتر
1250 وحدة/لتر
300 وحدة/لتر
0.4 ملمول/لتر
كاشف 3      قياسي 200 ملجم/ديسيلتر

طريقة التحضير :   
       قم بإذابة محتويات قارورة من الكاشف 2 مع محتويات قارورة من منظم الكاشف 1
العينة: مصل دم، بلازما تحتوي على هيبارين
الإجراء :
       طول الموجة …………… 505 نانومتر ( 500 550)
       درجة الحرارة …………...‎ ‎37 درجة مئوية
        فارغ   قياسي عينة
قياسي -       10 ميكرولتر -
عينة   -       -       10 ميكرولتر
الكاشف العامل        1 مل  1 مل  1 مل
       يتم تحضين المزيج لمدة 5 دقائق عند درجة حرارة 37 درجةمئوية ,يبقى اللون ثابت لمدة 30 دقيقة.
طريقة الحساب :
التركيز= الكثافة البصرية للعينة / الكثافة البصرية القياسية* تركيز المعيار
مراقبة الجودة
‌أ.      عند بداية كل نوبة عمل قم بتفعيل مواد مراقبة الجودة على المجالات الطبيعية وغير الطبيعية (ضوابط رقابية عالية ومتدنية). اعمل دائمًا على تفعيل مجموعة من الضوابط الرقابية بعد معايرة جهاز التحليل. إذا كانت الضوابط خارجة عن النطاق فلا تقم بتقديم نتائج المريض إلا بعد حل المشكلة حيث يتم إعادة تحليل عينات المريض باستخدام عينات مراقبة الجودة في إطار نطاق مقبول.
‌ب.    يتم التعبير عن التغير في صورة الانحراف المعياري ومعامل التغيير ويتم توضيحه من خلال مخطط بياني لتقييم الجودة يسمى Levy-Jennings graph
طرق الحساب :
يتم تقديم النتائج بوحدة ملمول/لتر.واستخدام طريقة حساب أخرى هو أمر غير ضروري إلا إذا تم تخفيف العينة.
النتائج
‌أ.      القيم المتوقعة: 3.6–5.2 ملمول/لتر
‌ب.    يجب على كل مختبر أن يؤكد تلك القيم.
القيود
‌أ.      تتداخل تركيزات البيليروبين التي هي أعلى من 4 ملجم/ديسيلتر مع الاختبارات
‌ب.    إذا كانت النتائج أعلى من 25.9مملمول/لتر يتم تخفيف العينة وإعادة قياسها.
‌ج.     سوف تعطي تركيزات حامض الأسكوربيك العالية (> 2.5 ملجم/ديسيلتر) نتائج متدنية.
‌د.      لا تتداخل نتائج الهيموغلوبين التي هى أعلى من 200 ملجم/ديسيلتر مع الاختبار
ثلاثي الجليسريد
ثلاثي الجليسريد هو بروتين أساسي في عملية النمو وتكوين الأنسجة الجديدة وإصلاح الأنسجة المصابة.وقد تكون الزيادة في معدلات ثلاثي الجليسريد هى نتيجة الإصابة بالكُلاء والركود الصفرواي والتهاب البنكرياس والتليف والسكري والتهاب الكبد. يظهر النقص عند سوء التغذية.
يعتمد التحليل على التميؤ الإنزيمي لثلاثي الجليسريد مع وجود إنزيمات الليباز في كينون إيمين المكونة من بيروكسيد الهيدروجين المستخدم كمؤشر ملون. وتكون كثافة اللون تناسبية لكمية ثلاثي الجليسريد الموجودة في العينة. يتم أخذ عينة مريض مقدراها 10 ميكرولتر ويتم دمجها وتحضينها مع كمية من المحلول مقداره 1000 ميكرولتر محتوية على مركب 4-أمينوأَنتيبيرين ومركب 4-كلوروفينول في وجود بيروكسيد الهيدروجين. بعد فترة تحضين تستغرق 10 دقائق يحدث تفاعل بين مركب 4-أمينوأَنتيبيرين ومركب 4-كلوروفينول وبيروكسيد الهيدروجين ينتج عنه تكون الكينون إيمين وهو ناتج
ملون.وتكون كمية المركب الملون المتكون تناسبية لكمية ثلاثي الجليسريد في العينة.

العينة
‌أ.      يوصى بأخذ عينة مقدارها 10 ميكرولتر من مصل الدم تحتوي على هيبارين أو بلازما رباعي أسيتيك ثنائي أمين الإيثيلين EDTA)). قم بجمع العينات بواسطة تقنية بزل الوريد القياسية. قد يستخدم الهيبارين كمضاد للتخثر لعينات البلازما. قم بحفظ العينات في حاويات مغلقة لتجنب حدوث تلوث أو تبخر. اتبع الاحتياطات العالمية عند القيام بالفصد أو التعامل مع عينات المريض أو ما تم معايرته أو أي منتجات أخرى أساسها هو مصل الدم. تخلص من المواد الملوثة بالنفايات المسببة للعدوى.
‌ب.    تجنب العينات التي بها انحلال في كريات الدم الحمراء.إذا لم يتم إجراء التحليل بشكل فوري يتم تجميد العينات عند درجة حرارة −25 درجة مئوية لمدة تصل إلى 4 شهور أو حفظها في ثلاجة بدرجة حرارة تتراوح من 2 إلى 8 درجات مئوية لمدة تصل لثلاثة أيام.
‌ج.     إذا كان التركيز أكبر من مجال جهاز التحليل قم بتخفيف جزء واحد من العينة بأربعة أجزاء من محلول ملحي مساوي التوتر أو ماء مقطر ثم قم بإعادة التحليل. قم بضرب النتيجة في 5 للحصول على تركيز ثلاثي الجليسريد الأصلي.
الكواشف والمواد
‌أ.      مقياس الضوء
‌ب.    أنبوب من الجل (مادة لتسريع التجلط)
‌ج.     منبذة
‌د.      ‎‎الكاشف     أنابيب محلول منظم(pH7.5)                  50 ملمول/لتر‎‎
       4-‎‎كلوروفينول                                                   5  ملمول/لتر
       4-أمينو أنتيبيرين                                           0.25 ملمول/لتر
       أيون المغنيزيوم                                               4.5 ملمول/لتر
       ثلاثي فوسفات الأدينوزين                                                             2 ملمول/لتر‎‎
       إنزيمات الليباز                                                             ≥ 1.3 وحدة/ملم
       بيروكسيداز                                                   ≥0.5 وحدة/ملم
       جليسيرول كيناز                                                 ≥ 0.4 وحدة/ملم
       جليسيرول-3-فوفسات الأوكسيداز                            ≥1.5 وحدة/ملم             
       ثلاثي جليسريد قياسي                                      2.28 ملمول/لتر
المعايرة
‌أ.      ‎‎‎تفريغ وغسيل الكوفيت المتدفق من خلال الضغط على [WASH] الموجود على شاشة LCD‎‎‎. سوف يحدث رجوع تلقائي لقائمة التحديد.
‌ب.    ‎‎ادفع كمية صغيرة من خلال الضغط على الرافعة [P] لتفريغ نظام الأنبوب.لا تقم بسكب أي محلول.
‌ج.     ‎‎قم بقياس 1000 ميكرولتر على وجه التحديد من الماء في كوب عينة ثم اسكب الماء المقطر بدفع كمية بالضغط على الرافعة [P]. سوف يتم تلقائيًا قياس 1000 ميكرولتر من حجم الكمية المسكوبة في الكوفيت المتدفق.
‌د.      سوف يتم عرض مدة الانتقال الخاصة بالهواء والماء على الشاشة.
‌ه.      ‎‎اضغط [] لإنهاء عملية المعايرة.‎‎ سوف يعود البرنامج إلى قائمة التحديد.
مراقبة الجودة
‌أ.      عند بداية كل نوبة عمل قم بتفعيل مواد مراقبة الجودة على المجالات الطبيعية وغير الطبيعية (ضوابط رقابية عالية ومتدنية). اعمل دائمًا على تفعيل مجموعة من الضوابط الرقابية بعد معايرة جهاز التحليل. إذا كانت الضوابط خارجة عن النطاق فلا تقم بتقديم نتائج المريض إلا بعد حل المشكلة حيث يتم إعادة تحليل عينات المريض باستخدام عينات مراقبة الجودة في إطار نطاق مقبول.
‌ب.    يتم التعبير عن التغير في صورة الانحراف المعياري ومعامل التغيير ويتم توضيحه من خلال مخطط بياني لتقييم الجودة يسمى Levy-Jennings graph
الإجراء
‌أ.      امزج أنبوبين أحدهما فارغ بكمية مقدارها 1000 ميكرولتر من الكاشف المعياري والأنبوب الثاني بكمية مقدارها 10 ميكرولتر من مصل الدم أو البلازما و1000 ميكرولتر من محلول الكاشف.
‌ب.    امزج كل منهما جيدًا ثم يتم تحضينهم لمدة 5 دقائق بدرجة حرارة 37 درجة مئوية ثم قم على الفور بقياس مدى امتصاص الكاشف المعياري والعينة وفقًا لما هو مشار إليه.
‌ج.     ‎‎اضغط على ZERO ثم أضف كمية صغيرة من خلال الضغط على الرافعة [P] لسكب الماء وتفريغ النظام.‎‎
‌د.      عندما يتم عرض MEASURE RB على الشاشة قم بوضع الكوفيت الذي به محلول خاوي في حامل الكوفيت ثم قم بشفط المحلول الخاوي بدفع الرافعة [P]
‌ه.      عندما يتم عرض MEASURE SAMPLE على الشاشة قم بتثبيت الكوفيت المحتوي على محلول العينة في حامل الكوفيت ثم قم بشفط محلول العينة بدفع الرافعة [P].
‌و.     ‎‎‎اضغط على [RESULT] وترقب لمهلة محتملة بينما يتم قياس محلول العينة.‎‎‎ سوف يتم عرض النتيجة على السطر الأعلى.
‌ز.     ‎‎‎قم بطبع النتائج أو تدوينها.‎‎‎ ‎‎‎اضغط على [WASH] لسكب محلول الشطف أو اضغط [MEASURE] لقياس العينة التالية بواسطة دفع رافعة السكب [P]‎‎‎.
طرق الحساب :
يتم تقديم النتائج بوحدة ملمول/لتر.واستخدام طريقة حساب أخرى هو أمر غير ضروري إلا إذا تم تخفيف العينة.
النتائج
‌أ.      القيم المتوقعة: 0.11-2.15 ملمول/لتر.
‌ب.    يجب على كل مختبر أن يؤكد تلك القيم.
القيود
‌أ.      العينات الدهنية تعمل على توليد تعكر في مزيج كاشف العينة وهو ما يؤدي إلى نتائج مرتفعة مغلوطة.
‌ب.    الأسكوربات يعطي قيمًا متدنية مغلوطة.
كوليستيرول الدهون عالية الكثافة
‎‎‎البروتين الشحمي رفيع الكثافة هو بروتين شحمي يشارك في نقل الكوليستيرول من الخلايا إلى الكبد.‎‎‎ وقد تكون الزيادة في معدلات البروتين الشحمي رفيع الكثافة هي نتيجة الإصابة بالكُلاء والركود الصفرواي والتهاب البنكرياس والتليف والسكري والتهاب الكبد. كما يظهر النقص في حالة سوء التغذية.
‎‎‎ يعتمد التحليل على ترسب الكيلومكرونات والبروتين الشحمي وضيع الكثافة والبروتين الشحمي منخفض الكثافة وذلك عند إضافة حمض الفسفوتنجستيك وكلوريد المغنيزيوم إلى العينة.‎‎‎ البروتين الشحمي رفيع الكثافة هو جزء من المادة الطافية والذي يمكن فحصه إنزيميًا بعد تنبيذ المادة الطافية. امتصاص العينة والكاشف المعياري يتم قياسه مقابل الكاشف الخاوي.
‎‎‎عندما يتم المزج بين 200 ميكروجرام من عينة الاختبار مع 500 ميكروجرام من الكاشف المترسب الذي يحتوي على حمض الفسفوتنجستيك وكلوريد المغنيزيوم في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق يتم ترسيب الكيلومكرونات والبروتين الشحمي وضيع الكثافة والبروتين الشحمي منخفض الكثافة.‎‎‎ إن التنبيذ بسرعة تبلغ 10000 جي لمدة دقيقتين يجعل البروتين الشحمي رفيع الكثافة هو فقط الموجود بالمادة الطافية حيث يتم تحديد تركيزه في العينة إنزيميًا.

العينة
‌أ.      ‎‎‎يوصى بأخذ عينة مقدارها 200 ميكرولتر من مصل الدم تحتوي هيبارين أو بلازما رباعي أسيتيك ثنائي أمين الإيثيلين (EDTA).‎‎‎ قم بجمع العينات بواسطة تقنية بزل الوريد القياسية. قد يستخدم الهيبارين كمضاد للتخثر لعينات البلازما. قم بحفظ العينات في حاويات مغلقة لتجنب حدوث تلوث وتبخر. اتبع الاحتياطات العالمية عند القيام بالفصد أو التعامل مع عينات المريض أو ما تم معايرته أو أي منتجات أخرى. تخلص من المواد الملوثة بالنفايات المسببة للعدوى.
‌ب.    إذا كانت المادة الطافية غير صافية فقم بتخفيف العينة قبل الترسيب بنسبة 1:1 بواسطة محلول ملحي نظامي ثم قم بضرب النتائج في 2 للحصول على التركيز الأصلي للبروتين الشحمي رفيع الكثافة.
‌ج.     يبقى كوليستيرول الدهون عالية الكثافة مستقرًا في مصل الدم لمدة 6 أيام في درجة حرارة تتراوح من 4 إلى 25 درجة مئوية ولمدة 4 أشهر عند درجة حرارة –20 درجة مئوية.  مصل الدم يجب أن يتم فصله من تجلط الدم بأسرع ما يمكن.
 الكواشف والمواد
‌أ.      مقياس الضوء
‌ب.    أنبوب من الجل (مادة لتسريع التجلط)
‌ج.     منبذة
‌د.      كاشف (مرسب)      حمض الفسفوتنجستيك           0.55 ملمول/لتر
‎‎‎                                       كلوريد المغنيزيوم              25 ملمول/لتر‎‎‎
‎‎‎                                        الكوليستيرول                  1.29 ملمول/لتر‎‎‎
المعايرة
‌أ.      ‎‎‎تفريغ وغسيل الكوفيت المتدفق من خلال الضغط على [WASH] الموجود على شاشة LCD‎‎‎. سوف يحدث رجوع تلقائي لقائمة التحديد.
‌ب.    ‎‎ادفع كمية صغيرة من خلال الضغط على الرافعة [P] لتفريغ نظام الأنبوب.لا تقم بسكب أي محلول.
‌ج.     ‎‎قم بقياس 1000 ميكرولتر على وجه التحديد من الماء المقطر في كوب عينة ثم اسكب الماء المقطر بدفع رافعة السكب "P". سوف يتم تلقائيًا قياس 1000 ميكرولتر من حجم الكمية المسكوبة في الكوفيت المتدفق.
‌د.      سوف يتم عرض مدة الانتقال الخاصة بالهواء والماء على الشاشة.
‌ه.      ‎‎اضغط [] لإنهاء عملية المعايرة.‎‎ سوف يعود البرنامج إلى قائمة التحديد.
مراقبة الجودة
‌أ.      عند بداية كل نوبة عمل قم بتفعيل مواد رقابة الجودة على المجالات الطبيعية وغير الطبيعية (ضوابط رقابية عالية ومتدنية). اعمل دائمًا على تفعيل مجموعة من الضوابط الرقابية بعد معايرة جهاز التحليل. إذا كانت الضوابط خارجة عن النطاق فلا تقم بتقديم نتائج المريض إلا بعد حل المشكلة حيث يتم إعادة تحليل عينات المريض باستخدام عينات مراقبة الجودة في إطار نطاق مقبول.
‌ب.    يتم التعبير عن التغير في صورة الانحراف المعياري ومعامل التغيير ويتم توضيحه من خلال مخطط بياني لتقييم الجودة يسمى Levy-Jennings graph
الإجراء
‌أ.      ‎‎‎امزج 200 ميكرولتر من عينة الاختبار (مصل الدم أو البلازما) مع 500 ميكرولتر من الكاشف المترسب في أنبوب طرد مركزي زجاجي.‎‎‎ ‎‎‎(خفف الكاشف المترسب بماء مقطر 4 في 1)‎‎‎
‌ب.    امزج بينهم جيدًا ثم يتم تحضينهم لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
‌ج.     قم بالنبذ بمعدل 4000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق أو 10000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقتين.
‌د.      ‎‎‎بعد التنبيذ قم بإزالة المادة الطافية الصافية في الأنبوب 1 (العينة)ثم أضف 100 ميكرولتر من المادة الطافية و1000 ميكرولتر من كاشف الكوليستيرول الكلي.‎‎ في الأنبوب 2 (الكاشف الخاوي) اضف 100 ميكرولتر من الماء المقطر و1000 ميكرولتر من كاشف الكوليستيرول.
‌ه.      امزج بينهم جيدًا ثم يتم تحضينهم لمدة 10 دقائق عند رجة حرارة تتراوح بين 20 إلى 25 درجة مئوية أو لمدة 5 دقائق عند درجة حرارة 37 درجة مئوية ثم قم بقياس الامتصاص الخاص بهم.
‌و.     ‎‎‎عندما يتم عرض MEASURE BLANK على الشاشة اضغط ZERO  ثم أضف كمية صغيرة من خلال الضغط على الرافعة [P] لسكب الماء وتفريغ النظام.‎‎‎
‌ز.     عندما يتم عرض MEASURE RB على الشاشة قم بوضع الكوفيت الذي به محلول خاوي في حامل الكوفيت ثم قم بشفط المحلول الخاوي بدفع الرافعة [P]
‌ح.     عندما يتم عرض MEASURE SAMPLE على الشاشة قم بتثبيت الكوفيت المحتوي على محلول العينة في حامل الكوفيت ثم قم بشفط محلول العينة بدفع الرافعة [P].
‌ط.     ‎‎‎اضغط على [RESULT] وترقب لمهلة محتملة بينما يتم قياس محلول العينة.‎‎‎ سوف يتم عرض النتيجة على السطر الأعلى.
‌ي.     ‎‎‎قم بطبع النتائج أو تدوينها.‎‎‎ ‎‎‎اضغط على [WASH] لسكب محلول الشطف أو اضغط [measure] لقياس العينة التالية بواسطة دفع رافعة السكب [P]‎‎‎.
 طرق الحساب :
يتم تقديم النتائج بوحدة ملمول/لتر.واستخدام طريقة حساب أخرى هو أمر غير ضروري إلا إذا تم تخفيف العينة.
النتائج
‌أ.      القيم المتوقعة: 0-0.9 ملمول/لتر.
‌ب.    يجب على كل مختبر أن يؤكد تلك القيم.
القيود
‌أ.      عندما يتداخل مستوى عالي من ثلاثي الجليسريد مع مقياس البروتين الشحمي رفيع الكثافة خفف العينة قبل الترسيب بنسبة 1:1 بمحلول ملحي بنسبة 0.9% ثم اضرب النتائج في 2.
‌ب.    سوف تعطي تركيزات حامض الأسكوربيك العالية (> 2.5 ملجم/ديسيلتر) نتائج متدنية.
‌ج.     تتداخل معدلات الهيموغلوبين التي هي أعلى من 100 ملجم/ديسيلتر ومعدلات البيليروبين التي هى أعلى من 10 ملجم/ديسيلتر مع الاختبار.

ليست هناك تعليقات:

إرسال تعليق